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今天柱层层析硅胶粉小编跟大家分享层析柱关于装柱和使用需要注意的事项:
1、装柱前要仔细看填料的使用说明书,每种填料都有自己的特性,以及特殊的装柱方法,针对不同的空柱,也要注意方法可能不同。
2、填料要加水搅拌成均匀悬液,悬液浓度依填料而不同,一般70-85%,迅速倒入空柱内,或吸或压,流速和具体步骤看说明书。
3、这一点非常重要:装柱包括以后使用中绝对不允许柱内进入气泡(bubble free),柱头事先也要排除气泡。
4、选择合适的泵,首先是流速满足要求,脉冲尽量小。首选柱塞泵。
5、所有柱子尽量做到填料均匀,尤其是用于凝胶层析的柱子。装柱完成后,可用柱效测定的方法检查装填效果。一个装填合格的柱子的理论塔板高度应是填料平均粒径的2-4 倍,在此范围内越小越好。
6、准备上柱的液体应进行过滤,至少是0.45micrometre。
7、至于测序,我想大概不到1mg 应该足够了。
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