薄层色谱硅胶制备板-吸附色谱的原理

一、吸附色谱的原理：吸附性薄层色谱法是将吸附剂在光洁的表面，如玻璃、金属或塑料等表面上均匀地铺成薄层色谱硅胶制备板，而后在上面点上样品，以流动相展开，这样，组分不断地被吸附剂吸附，又被流动相溶解，解吸而向前移动。

由于吸附剂对不同组分有不同的吸附能力，流动相也有不同的解吸能力，与吸附剂结合较紧密的组分较难被展开剂解吸，而与吸附剂结合较松散的组分则较容易被展开剂解吸。

因此在流动相向前流动的过程中，不同组分移动距离不同，原有的混合物就可以得到分离。分离度一般用比移值Rf值来表示，其数值可以通过被分离组分斑点中心离原点的距离与展开剂前沿离原点的距离之比计算出来。

二、吸附色谱中对固定相的要求

吸附色谱的固定相常称为吸附剂。目前最常用的吸附剂是硅胶和氧化铝，其次是聚酰胺、硅酸镁等，还有一些物质如氧化钙(镁)、氢氧化钙(镁)、硫酸钙(镁)、磷酸钙(镁)、淀粉、蔗糖等，但因碱性太大或吸附性太弱，致使用途有限;而活性炭的吸附性太强，本身又是黑色，故很少用于色谱分离。具体要求如下：

1.具有大的表面积和足够的吸附能力；

2.对不同的组分有不同的吸附性，因而能较好地分离不同的化学成分；

3.在所用的溶剂和展开剂中不溶解；

4.不破坏或分解供试品中各组分，不与供试品中溶剂和展开剂起化学反应；

5.颗粒大小均匀，一般要求直径小于70u.m(小于250目)且在使用过程中不会碎裂；

6.具有可逆的吸附性，既能吸附样品组分，又易于解吸附；

7.为便于观察分离结果，最好是白色固体。

三、吸附色谱中对流动相的要求

流动相的选择必须根据被分离物质与所选用的吸附剂性质这两者结合起来加以考虑。在用极性吸附剂进行色谱分离时，当被分离物质为弱极性物质时，一般选用弱极性溶剂为展开剂；被分离物质为强极性成分时，则需选用极性溶剂为流动相。如果对某一极性物质使用吸附性较弱的吸附剂，则流动相的极性亦必须相应降低。

在薄层色谱中，当吸附剂活度为一定值时(如Ⅱ级或Ⅲ级)，对多组分的样品能否获得满意的分离，决定于展开剂的选择。而展开剂的选择原则主要还是根据被分离物质的极性选择相应极性的展开剂。

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